白色念珠菌生化鑒定試劑盒適用于檢測(cè)人類動(dòng)植物組織勻漿,細(xì)胞上清液,血清,血漿,尿液或其他相關(guān)生物液體的濃度。
兩抗體一步夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)用于白色念珠菌生化鑒定試劑盒生化鑒定。將樣品,標(biāo)準(zhǔn)樣品和HRP標(biāo)記的抗體添加到預(yù)包被的孔中,然后孵育并*清洗。TMB用作顯色的底物。TMB在過氧化物酶的催化作用下轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色,在酸的作用下終轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。顏色深度與樣品中的顏色之間存在正相關(guān)。用酶標(biāo)記儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)量吸光度(OD值),并計(jì)算樣品濃度。
白色念珠菌生化鑒定試劑盒的操作步驟:
1、室溫平衡20分鐘后,從鋁箔袋中取出所需的膠條,然后用自密封袋將剩余的膠條放回4℃。
2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)樣品孔和樣品孔,并向標(biāo)準(zhǔn)樣品孔中加入不同濃度的50μl標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。
3、在樣品孔中,加入10μl待測(cè)樣品,然后加入40μl樣品稀釋液;未添加空白孔。
4、除了空白孔,將100μlHRP標(biāo)記的抗體添加到標(biāo)準(zhǔn)樣品孔和樣品孔的每個(gè)孔中。用封口膜將反應(yīng)孔密封,并在37℃水浴或恒溫箱中孵育60分鐘。
5、丟棄液體,在吸水紙上拍干,在每個(gè)孔中充滿洗滌液,靜置1分鐘,甩掉洗滌液,在吸水紙上拍干,并以此方式洗板5次(也使用洗衣機(jī)清洗木板)。
6、向每個(gè)孔中加入50μl底物a和50μLB,并在37℃下孵育15分鐘。
7、向每個(gè)孔中添加50μl終止溶液,并在15分鐘內(nèi)確定450nm處每個(gè)孔的OD值。