顯色培養(yǎng)基是一種用于微生物選擇性生長和鑒定的微生物培養(yǎng)基,能夠快速準(zhǔn)確檢測、初步鑒定和篩選病原菌和非病原菌。多色顯示、易于識別的菌落和較短的孵育時間可用于臨床和食品檢測實驗室及時做出重要決策。
一些顯色培養(yǎng)基可以讓幾種細(xì)菌同時生長和識別,使這些細(xì)菌產(chǎn)生不同的顏色。這是利用這些細(xì)菌攜帶不同的代謝酶。同時,在培養(yǎng)基中加入顯色混合物,即這些酶的顯色底物,裂解時顏色不同,便于區(qū)分。它主要是利用某種細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中所含的特定酶。這種細(xì)菌中含有的酶越多,使用該酶進行鑒定的準(zhǔn)確性和特異性就越高。酶的特定顯色底物被添加到顯色培養(yǎng)基中。當(dāng)細(xì)菌大量生長時,生色底物滲入細(xì)菌內(nèi)并被酶切割,就會產(chǎn)生顏色,從而菌落也會變色。其次,在培養(yǎng)基中加入抗生素或膽鹽混合物,以抑制其他無關(guān)細(xì)菌的生長,即提高選擇性,或調(diào)整培養(yǎng)基中的營養(yǎng)。一些無關(guān)的細(xì)菌因為缺乏營養(yǎng)而無法生長,而目標(biāo)細(xì)菌的營養(yǎng)可以在有色培養(yǎng)基中得到滿足,因此它們可以生長。
1、按照國家標(biāo)準(zhǔn)、Sn標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其他方法制備樣品溶液;
2、將25g樣品溶液加入225mlMEC肉湯或mtsb肉湯中,36℃培養(yǎng)18-24小時;
3、取1個帶3mm接種環(huán)的環(huán)富集液,劃線接種于O157顯色培養(yǎng)基上,制作2個平板;
4、36℃培養(yǎng)18-24h,O157:H7菌呈鮮紅色、淡紅色或紅色,菌落周圍無藍色暈圈;大腸桿菌和大腸菌群呈深藍色、藍色或紫色,菌落周圍有藍色暈圈;其他細(xì)菌呈藍色、黃色或無色;
5、典型菌落可用于O157:H7血清學(xué)檢測和全套生化檢測。
注意:顯色培養(yǎng)基結(jié)果必須在36℃培養(yǎng)24小時內(nèi)判讀,以免菌落顏色發(fā)生變化。